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核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室(PCR)設(shè)計(jì)與施工要求,有那些注意事項(xiàng)

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  • 發(fā)布日期:2021-11-08 09:11:59
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核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室(PCR)設(shè)計(jì)與施工要求,有那些注意事項(xiàng)

核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室(PCR)設(shè)計(jì)與施工要求,有那些注意事項(xiàng)插圖
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   基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn),其特征在于能夠大大增加DNA的痕跡,它是分子生物學(xué)研究和實(shí)驗(yàn)的常規(guī)方法。,PCR實(shí)驗(yàn)室廣泛用于生物學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域,例如:艾滋病檢測(cè),乙型肝炎,家禽疫病,致癌基因的檢測(cè)和診斷,DNA指紋圖譜,個(gè)人身份證明,親子身份證明和法醫(yī)證據(jù)等。今天,萬(wàn)諾凈化公司專業(yè)人員詳細(xì)解釋PCR實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計(jì)和構(gòu)造要求以及要點(diǎn)。

 

  一. PCR實(shí)驗(yàn)室的布局

  原則上,PCR實(shí)驗(yàn)室有四個(gè)獨(dú)立的工作區(qū),分別用于試劑制備區(qū),樣品制備區(qū),擴(kuò)增區(qū)和擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū),并設(shè)有專用走廊。每個(gè)工作區(qū)應(yīng)配備一個(gè)緩沖室。應(yīng)建立工作區(qū)和緩沖室。安裝聯(lián)鎖設(shè)備。具有不同功能的工作區(qū)域要分開(kāi)且獨(dú)立。每個(gè)工作區(qū)都有明顯的標(biāo)志,不能直接連接。如果它們正確連接,則應(yīng)安裝物品傳送窗口。前兩個(gè)區(qū)域是擴(kuò)增前區(qū)域,后兩個(gè)區(qū)域是擴(kuò)增后區(qū)域,即:試劑制備區(qū)——樣品制備區(qū)—— PCR擴(kuò)增室——產(chǎn)物分析室,不允許流通逆轉(zhuǎn)。實(shí)驗(yàn)室中的氣流也應(yīng)從前置放大器區(qū)域流向后置放大器區(qū)域,而不是反向流動(dòng)。紫外線燈應(yīng)安裝在每個(gè)工作區(qū)的頂部。紫外線燈的波長(zhǎng)為254mm,每20平方米40W紫外線燈。

  二.實(shí)驗(yàn)室各個(gè)區(qū)域的主要功能和設(shè)備

  1.試劑準(zhǔn)備區(qū):主要用于試劑準(zhǔn)備,分裝和主要反應(yīng)混合物的準(zhǔn)備。樣品制備套件中使用的材料應(yīng)直接運(yùn)送到該區(qū)域。試劑原料應(yīng)存放在該區(qū)域,并準(zhǔn)備該區(qū)域所需的試劑。該領(lǐng)域的主要設(shè)備是天平,冰箱,離心機(jī),采樣器,振蕩器等。對(duì)于氣流壓力控制,此區(qū)域沒(méi)有嚴(yán)格要求,通常為+ 10Pa。

  2.樣品制備區(qū):主要用于樣品存儲(chǔ),核酸提取,擴(kuò)增反應(yīng)管的存儲(chǔ)和添加以及DNA合成的測(cè)量。該領(lǐng)域的主要設(shè)備包括冰箱,生物安全柜,離心機(jī),采樣器,振蕩器等。該區(qū)域中的壓力梯度要相對(duì)于相鄰區(qū)域?yàn)檎龎?,以避免從相鄰區(qū)域到該區(qū)域的氣溶膠污染,通常為+ 10Pa。

  3.擴(kuò)增區(qū):主要用于DNA擴(kuò)增。此外,也可以在該區(qū)域中將制備的DNA模板(來(lái)自樣品制備區(qū)域)和主要反應(yīng)混合物制備(來(lái)自試劑制備區(qū)域)添加到反應(yīng)混合物中。該領(lǐng)域的主要設(shè)備包括:循環(huán)器,冷卻器,離心機(jī),采樣器等。該區(qū)域中的壓力梯度要求為:相對(duì)于相鄰區(qū)域的負(fù)壓,以避免氣體從該區(qū)域泄漏,通常為-25Pa。

  4.擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)域:測(cè)定擴(kuò)增產(chǎn)物。該區(qū)域的主要設(shè)備是酶標(biāo)儀,洗碗機(jī),取樣器和水浴。該區(qū)域中壓力梯度的要求是:相對(duì)于相鄰區(qū)域的負(fù)壓,通常為-25Pa,以避免擴(kuò)增產(chǎn)物從該區(qū)域擴(kuò)散到其他區(qū)域

  三. PCR實(shí)驗(yàn)室壓力控制和通風(fēng)系統(tǒng)

  每個(gè)區(qū)域之間應(yīng)該有一個(gè)單一的實(shí)驗(yàn)過(guò)程流,物流,人員流和空氣流,以形成單向流保護(hù)屏障,以防止實(shí)驗(yàn)室之間的相互干擾并防止氣溶膠擴(kuò)散污染實(shí)驗(yàn)過(guò)程。

  PCR實(shí)驗(yàn)室沒(méi)有嚴(yán)格的凈化要求,但為避免每個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域發(fā)生交叉污染的可能性,建議采用完整的排風(fēng)組織方式,并嚴(yán)格控制排風(fēng)比例,以確保每個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域的壓力要求。

  四. PCR實(shí)驗(yàn)室裝飾

  實(shí)驗(yàn)室的結(jié)構(gòu)要牢固,密閉;所有陰陽(yáng)角要成弧形;壁的內(nèi)壁光滑干凈,不積灰,耐腐蝕,易于清洗消毒。使用PVC壓延材料或環(huán)氧樹脂自流地板。該材料要滿足無(wú)縫,無(wú)泄漏,光滑和耐腐蝕的要求。

  五,PCR實(shí)驗(yàn)室注意事項(xiàng)

  1.各種區(qū)域的大小配置,試劑制備區(qū)域,擴(kuò)增區(qū)域,擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)域,空間可能相對(duì)較小,樣品制備區(qū)域應(yīng)放置在生物安全柜中并低溫冰箱,空間應(yīng)該更大。

  2.試劑制備區(qū)和樣品制備區(qū)均配有緊急洗眼器,以確保操作員安全。

 

  以上就是給大家介紹的PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)與施工要求詳細(xì)解析,可見(jiàn)我們對(duì)建設(shè)PCR實(shí)驗(yàn)室的要求是非常高的,要求各方面都要涉及到位。

 

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