一、實(shí)驗(yàn)室資質(zhì)要求

開(kāi)展核酸檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)室，應(yīng)當(dāng)符合《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》（國(guó)務(wù)院令第424號(hào)）和《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理辦法》（衛(wèi)辦醫(yī)政發(fā)〔2010〕194號(hào)）有關(guān)規(guī)定，具備經(jīng)過(guò)衛(wèi)生健康行政部門(mén)審核備案的生物安全二級(jí)及以上實(shí)驗(yàn)室條件，以及臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室條件。獨(dú)立設(shè)置的醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室還應(yīng)當(dāng)符合《醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室基本標(biāo)準(zhǔn)（試行）》《醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理規(guī)范（試行）》等要求。

二、實(shí)驗(yàn)室分區(qū)要求

原則上開(kāi)展新冠病毒核酸檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)設(shè)置以下區(qū)域：試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增和產(chǎn)物分析區(qū)。這3個(gè)區(qū)域在物理空間上應(yīng)當(dāng)是完全相互獨(dú)立的，不能有空氣的直接相通。各區(qū)的功能是：

1.試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)：貯存試劑的制備、試劑的分裝和擴(kuò)增反應(yīng)混合液的制備，以及離心管、吸頭等消耗品的貯存和準(zhǔn)備。

2.標(biāo)本制備區(qū)：轉(zhuǎn)運(yùn)桶的開(kāi)啟，標(biāo)本的滅活（適用時(shí)），核酸提取及其加入至擴(kuò)增反應(yīng)管等。

3.擴(kuò)增和產(chǎn)物分析區(qū)：核酸擴(kuò)增和產(chǎn)物分析。

根據(jù)使用儀器的功能，區(qū)域可適當(dāng)合并。如采用標(biāo)本加樣、核酸提取及擴(kuò)增檢測(cè)為一體的自動(dòng)化分析儀，標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增和產(chǎn)物分析區(qū)可合并。

三、主要儀器設(shè)備

實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)配備與開(kāi)展檢驗(yàn)項(xiàng)目相適宜的儀器設(shè)備，包括核酸提取儀、醫(yī)用PCR擴(kuò)增儀、生物安全柜、病毒滅活設(shè)備（適用時(shí)，如水浴鍋等）、保存試劑和標(biāo)本的冰箱和冰柜、離心機(jī)、不間斷電源（UPS）或備用電源等。

四、實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

實(shí)驗(yàn)室接到標(biāo)本后，應(yīng)當(dāng)在生物安全柜內(nèi)對(duì)標(biāo)本進(jìn)行清點(diǎn)核對(duì)。按照標(biāo)準(zhǔn)操作程序進(jìn)行試劑準(zhǔn)備、標(biāo)本前處理、核酸提取、核酸擴(kuò)增、結(jié)果分析及報(bào)告。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)建立可疑標(biāo)本和陽(yáng)性標(biāo)本復(fù)檢的流程。

1.試劑準(zhǔn)備。應(yīng)當(dāng)選擇國(guó)家藥品監(jiān)督管理部門(mén)批準(zhǔn)的試劑，并在選擇標(biāo)本采樣管和核酸提取試劑時(shí)，使用試劑盒說(shuō)明書(shū)上建議的配套標(biāo)本采樣管和提取試劑。核酸提取方法與標(biāo)本保存液和滅活方式相關(guān)，有些核酸提取試劑（如磁珠法或者一步法），容易受到胍鹽或保存液中特殊成分的影響，特別是一步法提取多需要使用試劑廠家配套的標(biāo)本采樣管。

2.標(biāo)本前處理。已經(jīng)使用含胍鹽的滅活型標(biāo)本采樣管的實(shí)驗(yàn)室，這一環(huán)節(jié)無(wú)需進(jìn)行滅活處理，直接進(jìn)行核酸提取，而使用非滅活型標(biāo)本采樣管的實(shí)驗(yàn)室，則有56℃孵育30分鐘熱滅活的處理方式。

3.核酸提取。將滅活后的標(biāo)本取出，在生物安全柜內(nèi)打開(kāi)標(biāo)本采集管加樣。核酸提取完成后，立即將提取物進(jìn)行封蓋處理。在生物安全柜內(nèi)將提取核酸加至PCR擴(kuò)增反應(yīng)體系中。

4.核酸擴(kuò)增。將擴(kuò)增體系放入擴(kuò)增儀，核對(duì)擴(kuò)增程序是否與試劑說(shuō)明書(shū)相符，啟動(dòng)擴(kuò)增程序。擴(kuò)增后反應(yīng)管不要開(kāi)蓋，直接放于垃圾袋中，封好袋口，按一般醫(yī)療廢物轉(zhuǎn)移出實(shí)驗(yàn)室處理。

五、實(shí)驗(yàn)室生物安全操作失誤或意外的處理

1.新型冠狀病毒毒株或其他潛在感染性材料污染生物安全柜的操作臺(tái)造成局限污染：使用有效氯含量為0.55%消毒液，消毒液需要現(xiàn)用現(xiàn)配，24小時(shí)內(nèi)使用。此后內(nèi)容中有效氯含量參照此濃度。

2.含病毒培養(yǎng)器皿碎裂或傾覆造成實(shí)驗(yàn)室污染：保持實(shí)驗(yàn)室空間密閉，避免污染物擴(kuò)散，使用0.55%有效氯消毒液的毛巾覆蓋污染區(qū)。必要時(shí)(大量溢撒時(shí))可用過(guò)氧乙酸加熱熏蒸實(shí)驗(yàn)室，劑量為2g/m3，熏蒸過(guò)夜；或20g/L過(guò)氧乙酸消毒液用氣溶膠噴霧器噴霧，用量8ml/m3，作用1～2小時(shí)；必要時(shí)或用高錳酸鉀-甲醛熏蒸：高錳酸鉀8g/m3，放入耐熱耐腐蝕容器（陶罐或玻璃容器），后加入甲醛（40%）10ml/m3，熏蒸4小時(shí)以上。熏蒸時(shí)室內(nèi)濕度60%-80%。

3.清理污染物嚴(yán)格遵循活病毒生物安全操作要求，采用壓力蒸汽滅菌處理，并進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室換氣等，防止次生危害。